Применительно к злакам этот способ окрашивания модифицирован И. Д. Романовым. Им подобрана оптимальная для пыльцы злаков концентрация флуорохрома.
Для исследования могут быть использованы свежие и фиксированные пыльники. Готовится 0.0025 %-ный раствор водорастворимого анилицового синего в 0.15 М растворе К2НР04 (рН 8.2). Содержимое пыльника выдавливается иглой в капли раствора на предметном стекле. Стенки пыльника удаляют. Объект накрывают покровным стеклом.
Анилиновый синий низкой концентрации и при среднефизиологическом значении рН является витальным красителем. Для того чтобы проводить наблюдения продолжительное время и пыльцевое зерно при этом оставалось живым, в каплю раствора с флуорохромом добавляют каплю 5—10 %-ного раствора сахарозы.
Наблюдение ведется под флуоресцентным микроскопом либо к обычному микроскопу приставляется люминесцентный осветитель ОИ-18. При наблюдении рекомендуется пользоваться фильтром УФС-6, пропускающим ультрафиолетовые лучи 365 нм. Анилиновый синий окрашивает каллозу и дает желтовато — зеленую флуоресценцию.