Факультет

Студентам

Посетителям

Определение содержания клетчатки в пищевой активности сапрофагов

При характеристике пищевой активности различных сапрофагов важным показателем является их способность разлагать клетчатку.

Моллюски, диплоподы, мокрицы, личинки двукрылых, энхитреиды известны как активные разрушители целлюлозы.

Содержание клетчатки определяют по количеству моносахаридов, образующихся при гидролизе клетчатки в концентрированной серной кислоте. Модификация этого известного метода применительно к малым навескам мертвых растительных тканей и экскрементов разработана Б. Р. Стригановой (1970).

Для определения используется материал, высушенный до постоянного веса, размельченный и просеянный через сито с диаметром отверстий 0,25 мм. Пробу весом 10—20 мг помещают в химическую пробирку и заливают 2 мл 80%-ной серной кислоты. Смесь тщательно размешивают стеклянной палочкой и оставляют на полтора часа для полного растворения клетчатки в кислоте. Затем смесь переносят в колбу и доливают туда около 100 мл воды. Колбу ставят в кипящую водяную баню на 2 часа, в течение которых происходит полный гидролиз клетчатки. После этого смесь охлаждают и центрифугируют в течение 15 мин. При 3 тыс. об/мин. Центрифугат доводят водой в мерной колбе до 100 мл и затем определяют в нем содержание глюкозы с помощью антронового реактива.

Состав антронового реактива: 200 мг антрона, 8 мл абсолютного этилового спирта, 30 мл дистиллированной воды и 100 мл концентрированной серной кислоты (уд. вес 1,94).

В химическую пробирку помещают 1 мл центрифугата и 10 мл антронового реактива. Содержимое пробирок перемешивают и нагревают на водяной бане в течение 7 мин. После этого пробирки сразу же охлаждают и их содержимое фотометрируют при длине волны 620 ммк. Концентрация глюкозы определяется по калибровочной кривой.

В растительных остатках разной степени разрушения всегда имеется некоторое количество моносахаридов и дисахаридов. Для определения исходного их содержания в исследуемом материале навеску 10—15 мг суспензируют в 10 мл дистиллированной воды, нагретой до 50°, в течение 10 мин. Затем смесь фильтруют и определяют в фильтрате содержание глюкозы антроновым методом.

При определении глюкозы, образующейся в результате гидролиза клетчатки, следует вычесть из общего количества глюкозы в первом гидролизованном растворе исходное количество глюкозы, рассчитанное на единицу сухого веса материал.

Содержание клетчатки (Ц), по расчету А. Р. Кизеля (цит. по Иванову, 1946), составляет 0,9 от количества глюкозы (Г). Г: Ц = 0,9. Для сравнения содержания клетчатки в разных видах растительного опада ее количество выражают в процентах от воздушно-сухого веса. Для каждого варианта опыта необходимо определение содержания клетчатки не менее чем в 5 повторностях.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.



Сообщить об опечатке

Текст, который будет отправлен нашим редакторам: