Факультет

Студентам

Посетителям

Методы определения размеров фитопатогенных спор грибов

Определение размеров спор необходимо в первую очередь при разделении отдельных видов грибов в пределах рода.

Его проводят с помощью окуляр-микрометра, вложенного в окуляр и имеющего 100 делений. Размеры, спор в поле микроскопа меняются в зависимости от выбора объектива, но окуляр-микрометр размещен выше системы линз и имеет постоянную шкалу, поэтому он пригоден для работы с разными объективами и при различном увеличении. Окуляр-микрометр нужно подбирать соответственно микроскопу, каждому объективу и каждому лаборанту, т. е. он требует калибровки; если во время измерения объектив меняют, то калибровку проводят заново.

Калибровка окуляр-микрометра. Цена деления окуляр-микрометра устанавливается следующим образом. Окуляр-микрометр вводят в окуляр, затем на столик микроскопа вместо препарата помещают объект-микрометр и, выбрав требуемое увеличение, устанавливают на резкость. Объект-микрометр представляет собой шкалу со 100 делениями, расположенными в 10 мкм (0,01 мм) друг от друга. С его

помощью определяют деления окуляр-микрометра. Сначала совмещают два любых деления обеих шкал, затем ищут отрезок, на котором опять совпадают два деления обеих шкал, и рассчитывают соотношения.

Например, 17 делений объект-микрометра совпадают с 40 делениями окуляр-микрометра. Следовательно, 40 делений окуляр-микрометра соответствуют 170 мкм (17X10 мкм). Расстояние между двумя делениями на окуляр-микрометре составляет 4,25 мкм (170:40). Этот расчет повторяют еще два раза, совмещая любые другие деления. В заключение из всех трех значений, которые в приведенном примере лежат между 4,25 и 4,30 мкм, рассчитывают среднее значение, которое и используется в качестве окончательной цены деления.

Этот показатель действителен только для данного микроскопа при применении объектива, используемого для калибровки, и для лаборанта, провощившего калибровку.

Измерение спор. Для измерения спор сначала готовят водный препарат (суспензию спор). Затем его помещают на предметный столик таким образом, чтобы линейка окуляр-микрометра проходила над спорой по продольной или поперечной ее оси (длина или ширина), подсчитывают деления окуляр-микрометра от одного конца споры до другого и умножают их число на цену деления. Как правило, измеряется самый большой диаметр в длину и в ширину, так как споры не всегда равномерны. Показатели других измерений, например отростков, также должны быть записаны. Изогнутые споры, например конидии Fusarium, измеряют от верхушки до верхушки.

Чтобы получить среднее значение, а также определить размах вариабельности от самой маленькой до самой большой споры, измеряют не менее 100 спор. В целом следует учитывать, что чем вариабельнее и разнообразнее споры, тем больше число обязательных измерений. Если споры разных видов сходны друг с другом, то для точного определения принадлежности возбудителя к одному из этих видов также необходимо большое число измерений.

Чтобы уменьшить затраты труда, целесообразно вначале собрать показатели окуляр-микрометра и лишь при статистической обработке провести перерасчет по цене деления.

Примечание. При измерении спор следует иметь в виду, что споры из гербарного материала меньше по размеру, чем на свежем материале. Поэтому, чтобы получить сопоставимые результаты, суспензию надо предварительно быстро прокипятить в концентрированной молочной кислоте. Размер спор, полученных in vitro, варьирует в зависимости от питательного субстрата; как правило, они несколько крупнее, чем образовавшиеся на растении-хозяине.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.



Сообщить об опечатке

Текст, который будет отправлен нашим редакторам: