Факультет

Студентам

Посетителям

Метод М. П. Солнцевой и В. П. Левковского

После аналогичной ферментативной мацерации (Хохлов и др., 1978) проводится препарирование каждой семяпочки в отдельности. Эта методика пригодна для видов со сравнительно крупными семяпочками, например для диких злаков.

Метелки диких злаков фиксируют по Чемберлену. Материал через 1 сут после фиксации переводят в 70 %-ный этиловый спирт или оставляют в фиксаторе, где он может находиться 1—3 мес. Ферментативной обработке предшествует окрашивание материала по Фёльгену. Для этого зафиксированные колоски промывают дистиллированной водой 4—5 ч. Гидролиз проводят в 3 этапа: в 1 н. НС1 — 1.5 ч, в 5 н. НС1 — 1.5 ч, в 1 н. НС1— 1 ч. В реактиве Шиффа материал выдерживают в холодильнике 16—17 ч. После окрашивания его промывают в 3 порциях сернистой воды по 30 мин в каждой порции. Затем промывают водопроводной водой в течение 3 ч и подкрашивают цитоплазму клеток гематоксилином Эрлиха (1.5 ч). Далее следует промывка дистиллированной водой 1—2 ч.

Завязи извлекают из колосковых и цветочных чешуй и помещают в цитазу, где оставляют их на ночь (17—18 ч) при комнатной температуре. Зародышевые мешки вычленяют, освобождая их острыми препаровальными иглами от покровов семяпочки.

Данный метод позволяет приготавливать и постоянные тотальные препараты зародышевых мешков. Для этого вычлененные зародышевые мешки переносят при помощи капилляра на влажную фильтровальную бумагу, находящуюся на предметном стекле. Обезвоживание зародышевых мешков проводят в спиртах возрастающей концентрации: 50 %-ный, 70-, 96- и 100 %-ный. Капля спирта наносится на зародышевый мешок и затем оттягивается фильтровальной бумагой. Таким же образом спирт меняют на ксилол. В каждой из этих жидкостей зародышевые мешки выдерживают по 10 мин.

Далее зародышевые мешки собирают с фильтровальной бумаги тупой препаровальной иглой с каплей более густого, чем обычный, канадского бальзама на конце и переносят на чистое предметное стекло с новой каплей канадского бальзама обычной консистенции. Материал накрывают покровным стеклом. Препарат сушат в термостате не менее 1 сут.

Для мацерации тканей семяпочки можно использовать и другие приемы. Так, П. Г. Куприянов (Хохлов и др., 1978) предлагает применять для этой цели ряд процедур, включающий нагревание материала в 4 %-ном растворе железоаммонийных квасцов до 70 °С, выдерживание при этой температуре в течение 15 мин, промывку материала в 2 порциях дистиллированной воды при той же температуре, охлаждение во второй из них до комнатной температуры, обработку в 75 %-ном растворе (от продажной) соляной кислоты в течение 1 ч и промывку в нескольких порциях дистиллированной воды при комнатной температуре в течение 5 ч.

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.



Сообщить об опечатке

Текст, который будет отправлен нашим редакторам: