Факультет

Студентам

Посетителям

Иммуноблоттинг

Иммуноблоттинг (от англ. blot — пятно) — высокочувствительный метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА или РИА.

Принцип метода заключается в том, что антигены возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их из геля на активированную бумагу или нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. Фирмы выпускают такие полоски с «блотами» антигенов. На эти полоски наносят исследуемую сыворотку. Затем, после инкубации, отмывают от несвязавшихся антител и наносят сыворотку против иммуноглобулинов того вида животного, который был донором исследуемой сыворотки, меченную ферментом. Образовавшийся на полоске комплекс (антиген + антитело исследуемой сыворотки + меченое антитело против иммуноглобулинов животного исследуемого вида) выявляют добавлением хромогенного субстрата, изменяющего окраску под действием фермента.