Факультет

Студентам

Посетителям

Витрификация («остекленение») сперматозоидов

В 1938 г. Люйет и Ходдэп сообщили о том, что большое число сперматозоидов лягушки оживало после пребывания в жидком воздухе при температуре —192°.

Для этого необходимо было обезводить сперматозоиды в крепком растворе сахарозы, а затем очень быстро охладить и согреть микроскопическое количество пробного материала.- По мнению авторов, остаточная вода переходила в стекловидное состояние и обратно без образования кристаллов льда, которые, как полагают, убивают живые клетки. У сперматозоидов петуха, частично обезвоженных путем добавления к сперме левулозы, после быстрого замораживания при —76° и оттаивания при температуре 42—45° восстанавливалась подвижность. Когда пробы в течение многих дней или нескольких месяцев хранили при температуре —76°, оживало около 30% сперматозоидов. Из 48 яиц, снесенных курами, которые были осеменены замороженной спермой, 12, казалось, были оплодотворены, но развитие эмбриона в них, наблюдавшееся невооруженным глазом, продолжалось не более 10—15 час. Когда в дальнейшем некоторые исследователи пытались применять методику витрификации человеческой спермы по Люйету, лишь у незначительного числа сперматозоидов, охлажденных до очень низких температур, после согревания восстанавливалась подвижность. Не лучшие результаты были получены в аналогичных опытах со сперматозоидами других млекопитающих.

Паркс частично разъяснил причину различий в результатах предшествующих исследователей. Он показал, что высокий процент человеческих сперматозоидов выживает после охлаждения до —79 или —196° и живет в течение длительного времени лишь в том случае, когда сравнительно большие пробы спермы охлаждают в ампулах или в широких пробирках. Очень быстрое охлаждение микроскопически малых проб в тонких капиллярах или в виде пленки не дает эффекта. Это послужило первым несомненным доказательством того, что быстрое охлаждение и согревание может принести вред сперматозоидам или другим клеткам млекопитающих. Сперматозоиды других млекопитающих не переносили быстрого охлаждения до очень низких температур даже в тех случаях, когда замораживали большие пробы спермы. Однако в то время не видели никакой опасности в самом сверхбыстром охлаждении. Наоборот, глубоко укоренилось мнение, что основной причиной повреждения живых клеток в процессе замораживания и оттаивания является образование кристаллов льда. Нитрификацию же воды при сверхбыстром охлаждении считали весьма существенной для выживания в условиях очень низких температур.