Оплодотворение икры
Для оплодотворения икры от нескольких предварительно отсаженных зрелых самцов получают сперму, которая должна быть только хорошего качества: умеренной густоты и желтоватой окраски.
Брюшко самца обмывают и обтирают сухой чистой тряпкой, после чего, изгибая спину и хвостовой стебель рыбы, получают сперму. Ее собирают в чистую, совершенно сухую стеклянную баночку. Так как не вся сперма созревает одновременно, каждый самец может быть использован несколько раз.
Определение качества спермы самцов производится по измерению объема эякулята (взвеси отдельных спермиев в спермиальной жидкости, содержащей очень мало органических веществ), продолжительности движения сперматозоидов, соотношению живых и мертвых спермиев, их концентрации, оплодотворяющей способности, выясняемой по проценту оплодотворения, визуальной оценке.
Объем эякулята (отдельных порций спермиев, выводимых наружу) служит одним из важных показателей оценки половой деятельности самцов. Он очень важен при отработке дозировок гипофизарных инъекций. Объем эякулята измеряют с помощью мерной посуды с точностью до 0,1—0,2 см3.
Продолжительность движения сперматозоидов устанавливают с помощью секундомера. Наблюдения проводят следующим образом. Сперму берут из пробирки препаровальной иглой и помещают на часовое стекло, на которое заранее внесена капля воды. Сперматозоиды рассматривают под микроскопом. Останавливают секундомер, когда большая часть спермиев (более 50—69%) переходит от поступательного движения к колебательному. Соотношение в эякуляте живых и мертвых спермиев выясняют двумя методами: во-первых, глазомерной оценкой по пятибалльной шкале и, во-вторых, вычислением процента жизнестойких спермиев по их отношению к окраске.
Первый способ дает результаты более быстро, но он менее точен.
Определение подвижности сперматозоидов по пятибалльной шкале было предложено Г. М. Персовым:
балл 5 — заметно движение всех спермиев. Движение только поступательное и подвижность спермиев настолько велика, что трудно акцентировать внимание на каком-нибудь одном сперматозоиде;
балл 4 — хорошо выражено поступательное движение, но в поле зрения встречаются спермин с так называемыми зигзагообразным и колебательным движением;
балл 3 — зигзагообразное и колебательное движение преобладает над поступательным, уже имеются неподвижные спермин;
балл 2 — поступательного движения почти нет, имеется только колебательное и изредка зигзагообразное; очень большой процент неподвижных спермиев (до 75%);
балл 1 — все спермин неподвижны.
Для оплодотворения следует использовать только сперму, оцененную 4 или 5 баллами.
Для выяснения соотношения по пятибалльной шкале маленькую каплю спермы помещают на предметное стекло, для ее активации добавляют каплю воды, препарат быстро накрывают покровным стеклом и рассматривают под большим увеличением микроскопа (увеличение в 400—600 раз).
Глазомерный подсчет проводят с помощью камеры Горяева, на которую смесителем (меланжером) наносят смешанную с водой сперму. Сперматозоиды, увеличенные в 280—400 раз, подсчитывают в пяти больших квадратах счетной камеры, каждый из которых состоит из 16 квадратиков (всего 80 малых квадратиков), и в больших квадратах, расположенных по диагонали сетки.
Концентрацию спермиев (в млн./мм3) подсчитывают по формуле: С=nD/Nv∙1000000, где С — концентрация спермиев: n — число сосчитанных малых квадратиков (80); D — степень разбавления (равна 200); v — объем малого квадратика (1/4000 мм3); N — число больших квадратов; 1000000 — множитель для получения результатов, млн./мм3.
Глазомерный подсчет проводят также фотоэлектрокалориметрическим методом, который основан на способности спермы ослаблять пропускаемый через нее пучок света пропорционально ее концентрации. Такой подсчет осуществляется при помощи фотоэлектрокалориметра.
По сравнению со счетной камерой Горяева применение фотоэлектрокалориметра позволяет ускорить процесс определения концентрации спермиев.
При визуальной оценке качества спермы используют такие показатели, как цвет и консистенцию. Сперма хорошего качества имеет консистенцию цельного молока, а плохого — обезжиренного. В первом случае она имеет белый цвет, а во втором — голубоватый.
Определение соотношения живых и мертвых спермиев путем окраски производится при помощи 5%-ного водного раствора эозина натрия. Для этого каплю спермы смешивают с более крупной каплей краски и шлифованным краем другого стекла делают тонкий мазок на предметном стекле. Затем быстро высушивают и под микроскопом (при увеличении в 300—400 раз) просматривают в пяти полях зрения подряд по 100 спермиев. Мертвые спермин окрашиваются в розовый цвет, а живые на розовом фоне головки имеют белый цвет.
Существует три способа осеменения икры: сухой, полусухой, мокрый.
Сухой способ. Сводится к тому, что к икре, смоченной полостной жидкостью, в которую погружены яйца в теле самок, приливают сперму и тщательно перемешивают их, а затем добавляют воду. Оплодотворяющая способность «сухой» спермы при хранении ее при температуре 1—4°С, по А. И. Шмидтову, сохраняется до 5 сут, однако перед употреблением качество такой спермы обязательно проверяют.
Мокрый способ (предложенный А. Н. Державиным). Осуществляется следующим образом. Икру промывают водой еще до осеменения, что приводит к удалению полостной жидкости, и лишь затем приливают сперму.
Полусухой способ (разработанный В. П. Врасским) (раньше он назывался сухим, или русским), отличается тем, что перед осеменением сперму разводят водой.
Многолетние опыты доктора биологических наук А. С. Гинзбурга показали, что наилучшие результаты получаются при применении полусухого способа, когда устраняется неблагоприятное влияние на сперму полостной жидкости, обычное при сухом способе.
Применение мокрого способа приводит к активации части икры еще до осеменения и, как следствие, к снижению процента оплодотворения. Часто образуются комки икры, которые не могут быть использованы в дальнейшей работе.
Техника осеменения икры осетровых сводится к следующему. В эмалированные тазы собирают икру от каждой самки отдельно. Сперму собирают также в сухие сосуды отдельно от каждого самца. Осеменение проводят не позднее чем через 10—20 мин после взятия икры. Задержка может привести к ухудшению результатов оплодотворения.
А. С. Гинзбург для осеменения рекомендует брать смесь спермы 3—5 самцов из расчета 10 см3 спермы на 1 кг икры и разводить ее водой в 200 раз. Так, для осеменения 8 кг икры осетра надо взять 80 см3 спермы и 16 л воды.
Перед осеменением из таза с икрой сливают избыток полостной жидкости. С помощью мерного цилиндра необходимое по расчету количество спермы выливают в ведро с водой, быстро размешивают и сразу приливают к икре. Затем в течение 3—5 мин икру круговыми движениями таза тщательно перемешивают с разведенной спермой, после чего воду со спермой сливают.
Обесклеивание икры
Вскоре после оплодотворения икра осетровых становится клейкой, могут образоваться комья и икра может погибнуть. Поэтому для освобождения от неиспользованной спермы, слизи, полостной жидкости и других примесей икру помещают в широкий таз и промывают водой. Затем икру обесклеивают. Для этого в таз с икрой наливают воду с примесью чистого речного ила (на 1 кг икры 0,5 л густой взвеси ила и 4 л воды) и перемешивают (икра должна находиться все время в движении) до тех пор, пока икринки не перестанут склеиваться. После обесклеивания икру промывают чистой водой и затем помещают в инкубационные аппараты. Обесклеивание икры обычно длится 40—60 мин независимо от видовой принадлежности.
Помимо ила, икру можно обесклеивать суспензией мела, танина, после которых на инкубируемой икре развивается меньше сапролегнии.
Обесклеивание — очень тяжелая и трудоемкая операция. Для облегчения ее Р. К. Латыпов сконструировал специальный аппарат, позволивший механизировать процесс отмывки икры. В аппарате Латыпова отмывка икры, загруженной в барабан, осуществляется с помощью четырех трехлопастных резиновых мешалок, произвольно установленных относительно друг друга. Приводной вал, на котором смонтирован вал барабана, приводится во вращение шкивной фрикционной передачей от группового привода.
В аппарат закладывают до 3 кг икры, рабочий объем барабана равен 33 л. Расход воды 2—2,5 л/мин. По качеству (процент оплодотворения, выход личинок из инкубационных аппаратов) икра, отмытая с помощью аппарата Латыпова, не отличается от икры, отмытой вручную.
Другой способ обесклеивания икры был предложен Э. В. Орловым. Изобретенный им аппарат представляет собой цилиндр с двойным дном, присоединяемый к системе подачи воздуха, получаемого от компрессора.
Обесклеивание производят следующим образом. В цилиндр подают воздух, затем в него наливают обесклеивающую взвесь и регулируют краном расход воздуха, чтобы пузырьки перемешивали жидкость в режиме кипения. После этого в аппарат загружается икра и начинается обесклеивание. Приспособление для перемешивания икры представляет собой перфорированный вкладыш, жестко закрепленный в нижней части емкости и связанный посредством патрубка и гибкого шланга с системой подачи сжатого воздуха.
Принцип работы аппарата Орлова лег в основу аппарата обесклеивания икры АОИ, сконструированного в специальном конструкторском бюро Министерства рыбного хозяйства СССР — Техрыбвод.
Аппарат представляет собой трубчатую раму. На ней имеется 5 сосудов для обесклеивания икры вместимостью по 11 л. В него загружают 2—3 кг икры.
В верхней части сосудов имеются водосборники и трубопроводы слива. На раме смонтирован откидной столик для емкостей с отмытой икрой и сливной лоток. К сосудам гибкими шлангами подводится воздух и вода, расход которых в каждом сосуде регулируется вентилями.
Перед обесклеиванием в сосуды заливается раствор речного ила и закладывается икра. Обесклеивание осуществляется барботированием содержимого сосудов с помощью подаваемого снизу воздуха. После окончания обесклеивания подается вода и производится отмывка икры от излишнего ила.
Особенностью аппаратов АОИ является то, что в них нет движущихся механических частей, травмирующих икру.
Инкубация икры
Икру осетровых можно инкубировать внезаводским и заводским способами. В первом случае икру инкубируют в водоеме, во втором — на берегу.
При внезаводском способе рыбоводный процесс заканчивается выпуском личинок в реку или озеро, где они в подавляющем большинстве становятся жертвой хищников. Этот метод применяют лишь в тех случаях, когда невозможен заводской способ инкубации.
Для внезаводского способа используют аппараты Сес-Грина и Чаликова, представляющие собой деревянные прямоугольные плавучие ящики, в которые помещают до 25 тыс. икринок осетра или 40 тыс. икринок севрюги. Инкубация икры в таких аппаратах имеет ряд существенных недостатков:
- во время шторма много икры гибнет от механических повреждений;
- плывущие по реке, иногда в большом количестве, нефтепродукты, попадая в инкубационные аппараты, пагубно влияют на инкубируемую икру;
- в аппаратах Сес-Грина икра уничтожается сорными рыбами и птицами;
- при уменьшении скорости течения в реке сильно возрастает отход икры;
- плавучие аппараты имеют незначительную пропускную способность и неудобны в эксплуатации.
В настоящее время на всех осетровых рыбоводных заводах инкубация икры осуществляется на берегу в специально оборудованных помещениях. Поэтому на этих предприятиях перечисленные выше отрицательные факторы не влияют на результаты инкубации икры.
Инкубационный цех состоит из инкубационного и оперативного отделений, лабораторного пункта, компрессорно-холодильного участка, помещения для получения живых кормов и бытовых помещений.
В инкубационном цехе имеется устройство для наполнения и хранения однодневных личинок. Из него личинки самотеком направляются в емкости для подращивания. Концентрация личинок в накопителе не должна превышать 500 шт./л воды.
В инкубационном отделении, которое освещается из расчета для севрюги и белуги до 100 лк, а осетра и шипа — до 20 лк, размещаются инкубационные аппараты. Подача воды в аппараты и ее сброс из них осуществляется круглосуточно. Водоснабжение в аппаратах независимое.
Для того чтобы в аппараты можно было подавать чистую, фильтрованную воду, в инкубатории необходимо иметь 2 уравнительных бака, обеспечивающих равномерную подачу воды к аппаратам. Объем баков рассчитывается с учетом подачи воды во все аппараты в течение 20 мин в случае аварии и отключения других источников водоснабжения.
В первый бак чистая вода поступает, подогретая теплом солнечной радиации или обогревательным прибором, во второй — охлаждения в теплообменниках холодильных установок. При смешивании холодной и теплой воды в определенных пропорциях в инкубационных аппаратах получают нужную температуру воды.
От каждого бака к инкубационным аппаратам идет самостоятельная система трубопроводов. Для стока прошедшей через аппараты воды в полу устраивают бетонные лотки, связанные с наружной сетью канализации.
Выклюнувшихся в аппаратах личинок доставляют по лоткам или трубам самотечным бесконтактным способом. По сравнению с их доставкой в ведрах такой процесс транспортировки ускоряется в 5—6 раз.
Оборудование и инвентарь, используемые для обслуживания личинок, должны иметь гладкую поверхность и изготавливаться из устойчивого к коррозии металла.
Существует несколько аппаратов для инкубации икры осетровых: П. С. Ющенко, А. Н. Щеколкина, В. М. Федченко и Л. Т. Горбачевой, Астраханского отделения Гидрорыбпроекта, Н. А. Заманова и М. А. Касимова, Б. Н. Казанского, И. А. Садова и Е. М. Коханской, АзНИИРХ.
Инкубационный аппарат П. С. Ющенко. Имеется четыре варианта этого аппарата. Однако наибольшее распространение получили вторая и третья модификации, отличающиеся одна от другой лишь размерами. Аппарат этих модификаций состоит из наружного и внутреннего ящиков и лопасти. Внутренний ящик полуовальной формы изготовлен из нержавеющей стали толщиной 0,7 мм, дно обтянуто латунной сеткой с ячеей 0,8—0,9 мм. На каждой из поперечных стенок имеется по два кронштейна, при помощи которых внутренний ящик крепится к наружному. В передней стенке имеется небольшое окно для выпуска личинок. Такое же окно имеется и в передней стенке наружного ящика. Между окнами проходит закрытый конусный лоток. Во внутреннем ящике по бокам отверстия имеются пазы, в которые вставляется задвижка.
Прямоугольный наружный ящик изготавливается из оцинкованного железа. С наружной стороны передней стенки ящика под центральным окном проходит открытый лоток, направленный в сторону продольной стенки. Лоток одним концом выходит за ее борт. Несколько выше центрального окна имеется еще одно окно со сливным лотком для сброса излишней воды. В передней части дна ящика имеется кран для спуска воды из аппарата. Лопасть состоит из основания и прикрепленной к нему вертикально зигзагообразной пластинки. Основание крепится к раме.
Аппараты в количестве четырех штук монтируются на деревянном столе. Монтаж установки производится следующим образом.
На расстоянии 15 см один от другого устанавливают наружные ящики; внутрь каждого из них вкладывают по одной лопасти, которые крепят к подвижной раме. Сверх лопастей устанавливают внутренние ящики. Под всеми аппаратами на линии кранов проходит деревянный лоток, имеющий в передней части отверстие.
Вдоль бортов ящиков с той стороны, куда направлены открытые лотки наружных ящиков, проходит лоток для выхода личинок. Борты стола стянуты двумя крепежными тягами, на концах которых шарнирно укреплены четыре ролика. На ролики устанавливают подвижную прямоугольную раму, продольные стороны которой изготавливают из уголкового железа, благодаря чему она может двигаться по роликам. К борту стола под откидную рейку крепят регулятор движения лопасти.
В поперечной проножке стола прикреплен шарнирно рычаг, на одном конце которого под отверстием лотка закреплен ковш, на другом — большой противовес.
Движение рамы с лопастями в ту и другую сторону осуществляется благодаря соединению ее с рычажным устройством. Наклон рычага и вследствие этого движение рамы в одну сторону осуществляется наполнением ковша водой, в другую — при помощи большого противовеса. Скорость движения лопасти зависит от расхода воды, регулируемого водоподающим краном. Движение лопасти создает вихревые токи воды, проникающие через сетчатое дно внутреннего ящика и перемешивающие икру, не давая ей застаиваться.
Перед началом работы аппарат наполняют водой на 2—3 см над сеткой, лопасть устанавливают на максимальную скорость (10—12 движений в минуту), затем загружают икру по норме.
В аппарат закладывается 8 кг икры (300 тыс. шт. икры белуги или 400 тыс. шт. осетра или шипа) или 6 кг севрюги (600 тыс. шт.). Отход за инкубацию составляет: 30% белуги, 25—30% осетра, 30—35% севрюги, 30% шипа.
Инкубационный аппарат конструкции А. Н. Щеколкина. В аппарате перемещение инкубируемой икры происходит не только в горизонтальной, но и в вертикальной плоскости. Икра все время находится во взвешенном состоянии. Мертвые зоны, в которых возможно залегание икры, отсутствуют. Аэрируется весь объем воды. Поэтому в аппарате Щеколкина создаются хорошие условия для инкубации икры.
Аппарат состоит из нескольких частей, монтируемых на станине. В баке вместимостью 220 л устанавливают винипластовое решето с объемным, изготовленным из металлической сетки 1 х 1 мм днищем. На решето закладывается инкубируемая икра. В днище установлен мембранный клапан. Под ним сделано отверстие для сброса излишней воды. При движении контейнера вниз мембранный клапан закрывается, что исключает возможность заполнения контейнера через днище. В прикрепленном к решету контейнере из органического стекла концентрируются выклюнув шиеся личинки. Решето с контейнером приводится в возвратнопоступательное движение с помощью приводного вала.
Инкубационный аппарат работает от электродвигателя постоянного тока через редуктор и цилиндрические шестерни. Сидящие на приводном валу кулачки осуществляют подъем толкателей, передающих возвратно-поступательные движения решету и контейнеру через штанги, закрепленные в серьгах.
В аппарате Щеколкина может инкубироваться одновременно 6—7 кг икры. В отличие от инкубационного аппарата Ющенко отбор выклюнувшихся личинок происходит не вручную, а механически. В нем возможно регулирование инкубационного режима.
Установка для инкубации икры УЛ-2.0 конструкции В. М. Федченко и Л. Т. Горбачевой. Установка предназначена для инкубации обесклеенной икры, отбора поврежденной и мертвой икры, сортировки, концентрации и выдерживания личинок. Устройств для инкубации состоит из емкости, подвижного кронштейна шарнирно подвешенного в ней одной стороной и имеющего поплавок на противоположной стороне; ящика с сеткой для размещения икры, закрепленного на подвижном контейнере; регулятора наклона ящика в емкости; гибкого желоба для слива воды и направления личинок в устройство для их сортировки и 4 аппаратов с автономным водоснабжением, применение которых позволяет полностью механизировать процесс водоснабжения.
Перемешивание икры происходит за счет периодических возвратно-поступательных движений в вертикальной плоскости под действием привода. Поврежденная и погибшая икра в ходе инкубации перемещается током воды на слив к устройству для ее очистки.
Привод состоит из двух ковшей — нижнего и верхнего перекидного. Верхний ковш срабатывает при заполнении определенного объема водой. Нижний ковш является сливным. Он имеет донное отверстие с задвижкой. При срабатывании перекидного ковша содержимое переливается в сливной ковш.
Под действием силы тяжести воды подвижной кронштейн с рыбоводным ящиком опускается на 3—7 см, а затем по мере сброса воды из сливного ковша медленно всплывает в исходное положение.
Для отбора погибшей икры имеется специальный очиститель, выполненный в виде прямоугольной пластины, установленной поперек емкости на ее сливе. Пластина согнута посередине под углом 170° и установлена над слоем икры с зазором 2—3 см сгибом навстречу потоку воды. Она перекрывает поверхностный слив путем создания эффекта сифонирования над поверхностью слоя. Наиболее легкие икринки, сконцентрированные на сливе, захватываются потоком воды с поверхности слоя и выносятся в канализацию.
Устройство для сортировки личинок имеет узкий проточный короб с тремя заслонками, размещенными по длине короба. Личинки проходят через систему заслонок и через определенный период времени потоком воды выносятся в устройство для выдерживания, которое выполнено в виде проточной емкости с наклонным дном и сливом воды через сток с цилиндром, имеющим сетчатое дно. В результате создается возможность увеличить скорость течения и расход воды на сливе, а следовательно, и количество выдерживаемых личинок.
Инкубационный аппарат конструкции Астраханского отделения Гидрорыбпроекта. От инкубационного аппарата Ющенко отличается более совершенной циркуляцией воды, возможностью производить отбор выклюнувшихся личинок автоматически, увеличением количества инкубируемой икры и уменьшением ее отхода в период инкубации.
В результате использование этого аппарата позволяет увеличить производственную мощность цеха на той же площади и уменьшить трудоемкость обслуживания.
Аппарат работает следующим образом. Обеззараженная вода через флейты подается в пространство между ванной и инкубационным ящиком. Избыток воды переливается через отверстие инкубационного ящика и выводится в лоток с водоотделением, который обеспечивает пропуск личинок с минимально необходимым количеством воды. Остальная часть воды по лоткам отводится на колесо привода мешалки. Слив воды приводит к возникновению восходящего потока свежей воды, имеющей большое содержание растворенного кислорода.
Возникающее в поверхностном горизонте течение способствует выводу из ящика выклюнувшихся личинок, выносимых потоком воды по шлангу и лотку к месту их концентрации.
Имеющаяся в аппарате мешалка, совершающая возвратно-поступательное движение, размещена между дном ванны и сетчатым дном инкубационного ящика. Мешалка в период работы создает волну, в результате чего инкубируемая икра поддерживается во взвешенном состоянии.
Мешалка движет водяное колесо. Вынос икры предотвращается съемным сетчатым затвором. В аппарате имеется 8 инкубационных ящиков вместимостью по 2,5 кг каждый. Расход воды в одном ящике до 5 л/мин, а на гидравлический привод — до 110 л/мин.
Детали аппарата, соприкасающиеся с икрой и личинками, изготавливаются из нержавеющей стали, а дно инкубационных ящиков — из латунной сетки с ячеей 1 мм2. Выход личинок из одного инкубационного ящика следующий (в шт.): 75 тыс. личинок белуги, 100 тыс. личинок осетра и 150 тыс. личинок севрюги.
Универсальный аппарат для инкубации икры осетровых Н. А. Заманова и М. А. Касимова. Для этого аппарата не нужен специальный инкубаторий. Его размещают в одном из бассейнов, находящемся в центре. Это круглый металлический каркас диаметром 2,2 и высотой 0,2 м. Вдоль его внутренних стенок расположены секции — металлические съемные ящики, дно которых обтянуто латунной сеткой. Между их дном и дном бассейна оставляют просвет 50 мм для свободного вращения лопастей пропеллера. На наружной торцовой части ящика на расстоянии 20 мм от дна устанавливают металлический сифон — патрубок длиной 90 мм для автоматической выборки живых личинок. Лопасти пропеллера приводятся в движение с помощью механической системы (ковш, противовес, коромысло и блок конических шестеренок).
Вода поступает в ковш, приводя систему в движение. Затем выливается в центральную часть аппарата и, омывая все секции, периферийным вытоком через сифон поступает в бассейн (в период выклева личинок) или в канализацию. При инкубации икры 1 аппарат обслуживает 30 бассейнов.
Водоструйный аппарат для инкубации икры осетровых конструкции проф. Б. Н. Казанского. Аппарат Казанского состоит из стеклянного баллона, водосбросного кольца с водосливом на верхней части баллона, водоструйной головки сетчатого стаканчика-вкладыша.
В водоструйной головке осуществляется принцип раздельной регулировки центральной струи, идущей вертикально, и шести боковых струй, идущих под углом 15 к вертикали вдоль боковых стенок нижней конусной части баллона.
При помощи резинового шланга аппарат соединяется с источником водоснабжения. Кранами раздельно регулируется подача воды в баллон через центральное и боковые отверстия крышки водоструйной головки. Центральная струя при этом должна подымать икру в вертикальном направлении.
По второму каналу вода поступает в распределительную камеру водоструйной головки и выходит из нее под одинаковым давлением через шесть боковых отверстий. Боковые струи не дают икре быстро оседать и, подмывая ее, не позволяют застаиваться на сетчатом вкладыше. Благодаря этому крупная, тяжелая, плохо парящая в воде икра осетровых ведет себя в аппарате подобно более легкой, хорошо парящей в воде икре костистых рыб.
Аппарат обеспечивает одновременную инкубацию 2 л (не более 2,5 л) обесклеенной, набухшей икры осетровых (около 1,25 кг набухшей икры), что позволяет получить до 50 тыс. личинок осетра или 70—75 тыс. личинок севрюги.
Преимуществом этого аппарата перед другими является возможность установки его вне инкубационного цеха рядом с бассейном для личинок, что позволяет исключить транспортировку икры и личинок из инкубационного цеха в бассейны или пруды. Этот аппарат используется для опытных работ на Икрянинском рыбоводном заводе.
Лоточный инкубатор СК-75 конструкции И. А. Садова и Е. М. Коханской. В этом аппарате икра инкубируется в клейком состоянии — естественном состоянии зародышей, развивающихся на каменисто-галечном грунте.
Принцип действия лоточного инкубатора состоит в последовательном омывании лотков, установленных на направляющих дюралюминиевых уголках в общей металлической раме, простерилизованной и освобожденной от механических примесей водой.
На оба конца рамы установлены подъемные механизмы с винтами в верхней части, которые поднимают при помощи маховичка обе плоскости инкубатора.
В начале первого лотка на раме закреплена флейта, распыляющая воду, подаваемую в инкубатор. Вытекая из последнего лотка, вода попадает в сетчатый уловитель, находящийся в металлической ванне, установленной под последним лотком. Рассев икры производится специальной сеялкой, изготовленной из органического стекла.
Суммарная полезная площадь инкубатора равна 11,17 мм2. Один инкубатор вмещает 600—640 тыс. шт. икринок белуги, 670—690 тыс. шт. икринок осетра и 740—770 тыс. шт. икринок севрюги.
Уход за икрой в период инкубации состоит в поддержании рабочего режима всех устройств и осуществлении контроля за ее развитием. Раз в сутки путем движения лотков по направляющим икру промывают от осевшего ила.
Перед выклевом лотки поочередно вынимают из инкубатора и переносят в выростные бассейны. В бассейне поступающая в лоток вода вытекает из него в специальную ловушку, установленную поперек в конце лотка. Выклюнувшиеся личинки смываются водой в ловушку, из которой выносятся в бассейн.
Необходимым условием работы инкубатора является бесперебойная подача электроэнергии и стерильной воды, что позволяет устранить отрицательное влияние грибка сапролегнии.
Стерилизация достигается использованием ультрафиолетового излучения. Для его получения применяется малогабаритная бактерицидная установка (МБУ-3), сконструированная Е. М. Коханской и В. А. Теодоровичем. Необходимым условием стерилизации является отсутствие взвесей в воде.
Установка МБУ-3 оснащена ртутно-кварцевой лампой высокого давления с аргоно-ртутным наполнением ПРК-7. Она работает от сети напряжением 220 В и стерилизует 1 м3 воды в час.
Размер установки 400x400x350 мм. Она состоит из короба с крышкой и соленоидного мембранного вентиля. Короб разделен продольными и поперечными перегородками, обеспечивающими перемешивание всех слоев воды. Четыре перегородки создают хорошие условия для облучения, поскольку в местах перелива слой воды оказывается наименьшим. Имеющиеся в установке две лампы ПРК-7 с двумя сферическими отражателями крепятся к крышке. Регулирование водного режима осуществляется с помощью люков, расположенных на входе и выходе. Автоматизация этого процесса достигается имеющимся в установке соленоидным мембранным фильтром. Его работа регулируется пультом управления.
Опыт работы рыбоводных заводов показал, что инкубировать икру осетровых можно в аппаратах различных конструкций. Однако во всех установках требуется соблюдение ряда условий. А. С. Гинзбург и Т. А. Детлаф указывают, что колебания условий внешней среды в период инкубации не должны отличаться от нерестовых и достигать пороговых значений. Благоприятны ли данные условия для режима инкубации икры, определяют по таким показателям, как продолжительность развития и дружный выклев, количество уродов, размеры и причины отхода и жизнестойкость молоди. Особо важное значение имеет соблюдение наилучшего температурного и кислородного режима.
Так, инкубация икры осетровых при свойственных данному виду нерестовых температурах воды позволяет намного улучшить результаты. Например, известно, что для волжской белуги нерестовая температура находится в пределах 9 и 14°С. В опыте, проведенном сотрудником ЦНИОРХ А. А. Романовым, одну партию икры инкубировали при средней температуре 12,5°С, а другую — при 16,5°С. В каждый аппарат было заложено одинаковое количество икры — по 3 кг. Выживаемость икры, инкубировавшейся при 12,5°С, составила 79%. а при 16,5°С только 69%. Подобные результаты получены и при более высокой загрузке аппаратов. Так, при закладке в аппараты 3,5 кг соответственно получили 75 и 67%, при закладке 4 кг — 69 и 65%.
Очень важно знать объем воды, подаваемой в инкубационные аппараты. Этот показатель измеряется с помощью самопишущего кольцевого дифманометра (расходомера), позволяющего определить количество воды, прошедшей через трубопровод за определенный промежуток времени, и в зависимости от этапа развития икры увеличить или уменьшить поступление воды.
Инкубационные аппараты перед загрузкой икры необходимо дезинфицировать раствором марганцовокислого калия, приготовляемого из расчета 0,5 г этого реактива, растворенного в 1 л воды.
В инкубационные аппараты следует непрерывно подавать отфильтрованную, чистую, насыщенную кислородом воду.
Погибшие икринки из инкубационных аппаратов отбираются систематически, по мере их появления с помощью грохоток, представляющих собой 3—4-миллиметровые сетки (для белуги 5—6-миллиметровые), натянутые на проволочный каркас. Для удобства работы грохотка имеет ручку. Мертвые икринки можно отбирать также сифоном.
Для борьбы с грибком сапролегнией рекомендуется всю икру помещать в раствор малахитового зеленого, приготовленного из расчета одна часть этого реактива на 200 000 частей воды. На Дону для этих целей используют, по методу Л. Т. Карпусь, слабый раствор формалина. На 10—12 мин прекращают подачу воды в аппарат Ющенко и добавляют раствор формалина из расчета 15 см3 40%-ного препарата с поваренной солью (0,5% раствора) на 1 л воды. Икру с показателем оплодотворения 90% начинают обрабатывать на стадии средней гаструлы, с более низким — на стадии малой желточной пробки.
Оценка качества икры
Качество икры оценивается по проценту ее оплодотворения, отходу и типичности развития (по А. С. Гинзбург и Т. А. Детлаф).
Икра должна отвечать следующим требованиям: на этапе густруляции иметь темно-серый цвет, оболочки должны быть прозрачными, желток в виде темной пробки должен составлять одну треть диаметра икринки, масса одной штуки колеблется у белуги от 0,023 до 0,025 г, осетра — от 0,016 до 0,017 и севрюги — от 0,11 до 0,12 г.
На стадии вращающегося эмбриона икра должна быть прозрачной, со светлыми, значительно набухшими оболочками, положение тела кольцеобразное, хвост должен касаться головы, а зародыш активно двигаться в оболочке. Масса одной штуки изменяется у белуги от 0,025 до 0,028 г и осетра — от 0,17 до 0,018 г.
Процент оплодотворения лучше всего определять на стадии второго деления бластомеров. Перед взятием пробы икру в аппарате тщательно перемешивают и берут из него 200—300 икринок. Затем пробу разбирают, отделяя дробящиеся яйца от недробящихся, и по результатам подсчета определяют процент оплодотворения. Установлено, что этот показатель совпадает с общим процентом дробящихся яиц.
Наблюдения за икрой ведут в течение всего периода развития.
Хорошие результаты дают также наблюдения на стадии третьей борозды дробления или стадии восьми бластомеров.
После определения процента оплодотворения выясняют наличие активированной, партеногенетически развивающейся и полиспермной икры.
Активированная неоплодотворенная икринка характеризуется наличием в центре анимального полюса черного пятна, обычно окруженного кольцом. Она начинает дробиться позднее и на стадии второго деления четырех бластомеров, как правило, еще не имеет борозд на своей поверхности.
Полиспермная икра отличается ускоренным развитием. На стадии четырех бластомеров у полиспермной икринки их количество достигает 8.
Для партеногенетически развивающейся икры характерно неправильное дробление, которое протекает хаотично. Бластомеры между собой различаются как по величине, так и по форме. Они имеют расплывчатую мутную окраску.
Учитывая, что активированные, партеногенетические развивающиеся и полиспермные икринки в процессе развития погибают, при определении процента оплодотворения их также следует исключить из общего количества дробящихся зародышей.
Отход определяется обычно на трех стадиях:
- проба 1 — конец гаструляции и начало нейруляции;
- проба 2 — период закладки сердца;
- проба 3 — перед началом вылупления.
В пробах должно быть по 300—500 икринок.
Проба 1. Вначале отделяют погибшие мраморного цвета икринки и определяют их количество в пробе. Затем отделяют уродливые зародыши с большой желточной пробкой неправильной формы. В остальной части пробы исследуется сходность и типичность строения зародышей. Наличие икринок с желточными пробками разных размеров и начало нейруляции еще до полного втягивания желточной пробки внутрь зародыша свидетельствуют о недостаточно благоприятных условиях развития.
Проба 2. При отсутствии в аппаратах сапролегнии до взятия этой пробы определяют процент отхода. Для этого подсчитывают количество неправильно развивающихся и погибших икринок. У живых икринок выясняют, имеются ли нарушения в развитии головы.
Проба 3. После тщательного перемешивания из аппарата берут 300—500 икринок и помешают в кристаллизатор. После окончания выклева личинок (обычно через сутки) подсчитывают общее количество живых личинок и зародышей, оставшихся в оболочках.
Расчет отхода икры за период инкубации в соответствии с инструкцией по разведению молоди осетровых в дельте Волги производится следующим образом.
Пусть общее количество полученной икры будет равно 1 млн. шт. Процент оплодотворения 92, т. е. живой икры будет 920 000 шт.
Получено однодневных личинок 780 000 шт., что составляет 780000∙100/920 000 = 84,8% общего количества живой икры.
Следовательно, за период инкубации погибло 15,2% икры, а выход личинок оказался равным 84,8%.
Транспортировка личинок из инкубационного помещения к бассейнам
Выклюнувшихся личинок выгружают из инкубационных аппаратов и обычно переносят в рыбоводных ведрах для дальнейшего выращивания в бассейны. Однако эту трудоемкую работу можно сделать более производительной. Г. П. Мавриков предложил осуществлять транспортирование личинок по трубам. Загрузка предварительно подсчитанных личинок осуществляется с помощью бункера, построенного в инкубационном цехе. Испытания, проведенные на Волжском экспериментальном рыбоводном заводе, показали, что разгрузка инкубационных аппаратов по способу Г. П. Маврикова ускоряется в 5—6 раз и позволяет высвободить 4 рабочих. В период транспортировки личинки не травмируются.